بهینه سازی انتقال ژن هیگرومایسین فسفوترانسفراز به قارچ دکمه ای سفید agaricus bisporus از طریق باکتری آگروباکتریوم تو می-فاشینس

thesis
abstract

قارچ خوراکی دکمه ای سفید (agaricus bisporus) با تولید سالیانه 5 میلیون تن، از مهم ترین محصولات باغبانی به شمار می آید. این قارچ علاوه بر نقش مهمی که در تغذیه انسان دارد، در صنعت و پزشکی نیز حائز اهمیت می باشد. با وجود ارزش اقتصادی بالا و اهمیت بیوتکنولوژیک این قارچ، روش های اصلاحی سنتی بر روی این قارچ بدلیل چرخه زندکی خاص آن و نیز به دلیل تنوع ژنتیکی پایین در بین لاین های تجاری آن، بسیار مشکل است. لذا در این-گونه موارد تراریزش ژنتیکی راهگشا می باشد. در این تحقیق به منظور بهینه سازی انتقال ژن در قارچ دکمه ای سفید از روش تراریزش با واسطه باکتری آگروباکتریوم تومی فاشینس برای انتقال موثر ژن گزینشگر هیگرومایسین فسفوترانسفراز (hph) استفاده شد. همچنین بیان ژن gus در نمونه های تراریخته مورد آزمایش قرار گرفت. بدین منظور از دو ریزنمونه تیغه و کلاهک و دو تیمار خلاء سرمایی و گرمایی استفاده گردید. آزمون مقدماتی تحت شرایط خلاء گرمایی نشان داد که هیچ یک از ریز نمونه های کلاهک روی محیط کشت انتخابی حاوی آنتی بیوتیک هیگرومایسین رشد نکردند، اما تراریزش ریزنمونه های تیغه موفقیت آمیز بود و پس از آزمون pcr برای تایید حضور ژن های hph و gus، نرخ تراریزش در این ریزنمونه برابر با 33/0% بود. در آزمایش تکمیلی نرخ تراریزش ریزنمونه های تیغه پس از آزمون pcr برای ژن های hph و gus، به ترتیب 45/5% و 99/0% بود. در کلنی میسلیومی حاصل از ریزنمونه های تراریخته هیچ گونه تغییر رنگی پس از آزمون هیستوشیمیایی برای بررسی بیان ژن gus رویت نگردید. انجام آزمون rt-pcr حاکی از این بود که در ریزنمونه-های تراریخته از روی ژن gus، رونویسی انجام شده و mrna ساخته می شود اما منجر به تولید پروتئین نمی شود که دلیل آن به علت فقدان اینترون در ژن مربوطه بود.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

ساخت سازه دارای ژن فعال کننده پلاسمینوژن بافتی انسانی (t-pa) جهت انتقال به قارچ دکمه ای سفید (agaricus bisporus)

قارچ دکمه ای سفید agaricus bisporus یکی از مهمترین قارچ های خوراکی در دنیا به شمار می رود، اما به دلیل ساختار ژنتیکی و نوع زندگی ای که دارد اصلاح آن با روش های مرسوم با مشکلاتی همراه است. از طرفی شباهت سیستم گلیکوزیلاسیون قارچ دکمه ای سفید با سلول های پستانداران سبب گردیده تا این قارچ به عنوان کارخانه زیستی جهت تولید پروتئین های نوترکیب گلیکوزیله، از جایگاه قابل توجهی برخوردار گردد و نیاز به اس...

15 صفحه اول

استفاده از ورمی کمپوست در تولید خاک پوششی برای پرورش قارچ دکمه ای (Agaricus bisporus )

  خاک پوششی یکی از عوامل مهم تولیدی قارچ دکمه‏ای است‌ که تأثیر مستقیمی بر اندازه و عملکرد آن دارد. با توجه به دسترسی آسان منابع، برای تولید ورمی‏کمپوست این ترکیب می‏تواند در جایگزینی پیت که یکی از پرهزینه‏ترین عوامل تولید در پرورش قارچ دکمه‏ای است استفاده شود. این پژوهش با 9 تیمار و سه تکرار در قالب طرح کاملاً تصادفی در سال 1392 در دانشکدۀ کشاورزی دانشگاه گیلان انجام شد. تیمارهای مختلف ورمی‌کمپ...

full text

بررسی امکان انتقال cdna ژن منگنز پراکسیداز(mnp) از قارچ خوراکی صدفی (pleurotus ostreatus) به قارچ خوراکی دکمه ای سفید (agaricus bisporus)

یکی از مشکلات موجود در صنعت پرورش قارچ خوراکی دکمه ای سفید، کاهش و یا توقف تولید بعد از برداشت سوم است که به نظر می رسد عامل اصلی این مشکل، اتمام مواد غذایی برای مصرف این قارچ و عدم توان استفاده بهینه از کمپوست باشد. پس از اتمام فرآیند کمپوست سازی، اساساً کمپوست شامل دو ترکیب اصلی غذایی، لیگنوسلولز و بیوماس میکروبی می باشد. اما این بیوماس میکروبی که با بالا رفتن دما در انتهای مراحل اول تهیه کمپو...

طراحی و ساخت ناقل بیانی ژن فعال کننده پلاسمینوژن بافتی انسانی برای قارچ دکمه ای سفید agaricus bisporus

سیستم گلیکوزیلاسیون قارچ دکمه ای سفید مشابهت زیادی با سلول های پستانداران دارد و سبب شده است تا این قارچ برای بیان پروتئین های نوترکیب گلیکوزیله، از جایگاه قابل توجهی برخوردار گردد. فعال کننده پلاسمینوژن بافتی انسانی یک پلی پپتید تک زنجیره ای گلیکوزیله است که سبب از بین رفتن لخته های خونی می شود. راه انداز gpdii نژادهای im008 و holland737 قارچ دکمه ای سفید با استفاده از واکنش زنجیره ای پلی­مراز...

full text

جداسازی و همسانه سازی (cloning) cdna ژن منگنز پراکسیداز (mnp) از قارچ خوراکی دکمه ای سفید (agaricus bisporus)، مقدمه ای بر دست ورزی ژنتیکی

تولید و پرورش قارچ خوراکی، یکی از کاربردهای تجاری فناوری های میکروبی به منظور تبدیل زیستی ضایعات بخش کشاورزی به فرآورده های با ارزش غذایی است. در قارچ­ خوراکی دکمه ای ( agaricus bisporus ) آنزیم های مختلفی از ابتدای رشد میسلیومی تا انتهای دوره میوه­دهی، تجزیه ترکیبات لیگنینی را در محیط کمپوست برعهده دارند. یکی از مهمترین این آنزیم ها، آنزیم منگنز پراکسیداز است که سهم عمده­ای در تجزیه ترکیبات لی...

full text

بهینه سازی کشت بافت و انتقال ژن GUS به موسیر با استفاده از آگروباکتریوم

موسیر (Allium stipitatum) یک سبزی خوراکی بوده و از خصوصیات دارویی بسیار مهمی برخوردار است. بنابراین بهینه­سازی یک سیستم باززایی و تراریزش کارآمد در این گیاه جهت بهبود و اصلاح آن از طریق مهندسی ژنتیک ضروری است. دراین مطالعه، ریزنمونه­های جنین، طبق پیاز و ریشه درون شیشه­ای موسیر درمحیط کشت MS حاوی غلظت­های مختلفی از تنظیم کننده­های رشد NAA، 2,4-D و BA به­منظور القاء کالوس و باززایی کشت شدند. ریزن...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023